iGENEA أسلوب التحليل

أسلوب التحليل

تؤخذ مسحة الغشاء المخاطي. يتم وضع المسحة في محلول مؤقت بحيث لا تفسد العينة.

عند وصول وتسجيل العينات في FamilyTreeDNA في هيوستن (الولايات المتحدة الأمريكية) ، سيتم إرسال العينات وأي معلومات إضافية مهمة إلى المختبر (مركز أبحاث الجينوم) للمعالجة.

من أجل التمكن من استخراج الحمض النووي من عينة المسحة ، يضاف إنزيم (بروتيناز K) إلى كل عينة لتفجير الخلايا وإطلاق الحمض النووي في المحلول. يتم التعامل مع عينات الطب الشرعي مثل الطوابع الممزقة أو الأسنان بطريقة مماثلة. يتم وضع قطعة من الطوابع في محلول بروتيني عازلة. يتم احتضان جميع العينات بين عشية وضحاها (تسخينها إلى 56 درجة مئوية) وتهتز لجعل الخلايا أسهل في الانهيار.

يتم مسح الباركود من لوحة تخزين جديدة للحمض النووي في ووضعها في الروبوت pipetting. يتم فحص عينات العملاء الفردية أيضًا. يقوم الروبوت دائمًا بنقل 8 عينات في وقت واحد إلى لوحة واحدة حتى 96 عينة لاستخراجها. تحتوي هذه اللوحة بالفعل على محلول يحتوي على حبات مغناطيسية صغيرة. يتم خلط محلول مغناطيس الحمض النووي جيدًا لاجتذاب الحمض النووي المشحون سالبًا من حبات مغناطيسية موجبة الشحنة.

يتم وضع اللوحة على حامل مغناطيسي ويتم سحب المحلول العازل بعناية. يتم غسل الخرز المغناطيسي مع الحمض النووي وأخيراً يتم ضخ "مخزن تخزين الحمض النووي" في كل من الآبار 96. يتم وضع اللوحة على كتلة التدفئة وتسخينها إلى 65 درجة مئوية. الحمض النووي يفصل نفسه عن الخرز المغناطيسي ويمر في المخزن المؤقت للتخزين.

يتم فتح لوحة المحمل المزودة بـ 96 وعاء تخزين منفصل (أنابيب مفردة مع أغطية زرقاء). يتم نقل المخزن المؤقت ، الذي يحتوي الآن على الحمض النووي ، إلى الأنابيب الفردية للتخزين. يتم إغلاق الأنابيب مرة أخرى.

يتم مسح اللوحة بأكملها. كل أنبوب واحد لديه الباركود الخاص به في الأسفل. يتم تعيين كل رقم نموذجي بشكل فريد إلى الرمز الشريطي وتخزينه في قاعدة بيانات REMP. يتم تخزين اللوحة التي تحتوي على عينات من الحمض النووي في -20 درجة مئوية في نظام الفريزر.

يتم تحليل العينات المطلوب تحليلها من قاعدة بيانات REMP. الأنابيب الفردية من اللوحات الحاملة مثقوبة في "لوحة التسليم". يتم فحص الباركود من الأنابيب الفردية مرة أخرى للتحقق ، ويتم تقديم مزيج من المواد الكيميائية والأصباغ لتحليل الحمض النووي (مزيج التمهيدي) في لوحة PCR 96 جيدا من الروبوت pipetting. يتم إذابة محلول DNA الذائب قليلًا في مزيج PCR ويتم ختم اللوحة برقاقة. يتم وضع اللوحة في جهاز PCR وبدأت برنامج لتكرار و "تلوين" الحمض النووي. في خطوات التدفئة والتبريد ، يتم نسخ الحمض النووي. بعد حوالي 3 ساعات ، يكون PCR مكتملاً ومنتجات PCR جاهزة للتسلسل أو الكهربائي.

منتجات PCR لتحليل ض. كما يجب تنظيف الحمض النووي الميتوكوندريا (mtDNA) قبل الكهربائي مرة أخرى ، والذي يأخذ الروبوت. بعد ذلك ، يتم نقل المنتجات PCR في ما يصل إلى 16 لوحة الناقل مع 96 عينة لكل التسلسل ووضعها في الجهاز الكهربائي.

في الجهاز ، تجولت كل عينة من الحمض النووي من خلال هلام مملوء بالهلام (البوليمر) والذي تم تطبيق جهد موجب عليه (قطب كهربائي). يمكن للجزيئات الصغيرة أن تمر عبر الجل أسرع من الجزيئات الكبيرة. لذلك يتم فرز الحمض النووي حسب "الحجم" وتسجيله بواسطة الكاميرا عن طريق وضع علامات اللون.

تسلسل قمم الأحمر والأزرق والأخضر والأسود يعطي تسلسل mtDNA (شخص معين).

الاحتمال الثاني هو تسجيل القمم المفردة (Short Tandem Repeats STR) z. في تحليل النمط الفرداني الصبغي للذكور.

يتم تقييم البيانات التحليلية التي تدعمها البرمجيات والتحقق مرة أخرى من قبل عالم. في حالات قليلة من الشك أو نتائج غير عادية ، تتشاور المجموعة الدولية من العلماء الذين يعملون في FamilyTreeDNA مع علماء الأحياء والتقنيين الحيويين الذين شاركوا في تحليل الحمض النووي وعلم الوراثة لأكثر من 15 عامًا.

هذه هي الطريقة التي يعمل بها تحليل أصل الحمض النووي

ان عينة لعاب تكون كافية للحصول علي الحمض النووي الخاص بكم. كما أن أن أخذ العينات تتم بسهولة و بدون ألم و يمكن اجراؤهافي المنزل. يرجي ارسال العينات في الغلاف المرفق لمجموعة أخذ العينات.